Циклизация
Страница 2

5. Для контроля очень полезно на каждой стадии отбирать небольшие аликвоты и подвергать их электрофорезу в 1,4%-ном агарозном геле с последующим переносом на нитроцеллюлозу или полиамид и блот-гибридизацией с supF-гтом. В случае успешной реакции циклического лигирования ДНК гена supF будет давать полосы в виде лестницы, и небольшое ее количество должно оказаться в той зоне геля, которая соответствует высокомолекулярной ДНК. После обработки рестриктазой ЕсоЩ лесенка supF-гена должна остаться, а полосы из высокомолекулярной области должны расщепиться на множество фрагментов размером от 1 до 20 т. п.н.

6. ДНК, обработанную ЕсоШ, экстрагируйте фенолом и осадите этанолом.

Страницы: 1 2 


Популярные статьи:

Классификация конституции человека по Сиго
Сиго и его ученики Шайю и Мак-Олаф считали, что конституционные типы есть результат воздействия окружающей среды, и разделили всех людей на 4 типа: 1. Церебральный (мозговой) 2. Респираторный (дыхательный) 3. Дегустативный (пищеварител ...

Почему исчезли динозавры?
Существует несколько теорий, обосновывающих разные причины вымирания динозавров 65 миллионов лет назад. Одна из них утверждает, что с Землей столкнулся огромный метеорит, в результате чего произошел мощный взрыв. Поднявшиеся в воздух пыль ...

Протопласты. Характеристика и получение
Растения – как многоклеточные организмы с огромной емкостью геномов, с половым путем размножения и многоступенчатыми программами развития – являются более сложными объектами для генноинженерных экспериментов, чем, например, вирусы, бактер ...