ДетергентыСтраница 2
Необходимость поддержания концентрации детергента на определенном уровне создает дополнительнее трудности помимо тех, с которыми обычно сталкиваются при очистке белков; о некоторых из них мы уже говорили. Проблемы возникают и при использовании стандартного метода высаливания при высокой концентрации сульфата аммония: во многих случаях белок осаждается в комплексе с детергентом и липидом. Поскольку солевой раствор имеет высокую плотность, а детергент в агрегате — относительно низкую, то при центрифугировании преципитат будет оставаться на поверхности. Важно помнить, что очистке подвергаются белково-детергентные комплексы, нередко со значительным количеством связанного фосфолипида. Это сказывается на качестве разделения при хроматографировании, а также на результатах характеристики конечного прорастворимых белков, нужно определить число и молекулярную массу полипептидных субъединиц, их стехиометрию, размер и, возможно, форму молекулы, а также, если это необходимо, биохимическую активность.
|
Детергент 1 В табл. 1 и 2 перечислены наиболее широко используемые детергенты и указаны их свойства, важные для обсуждаемых нами вопросов. Эмпирически наиболее эффективными являются: 1) неионные детергенты (тритон Х-100, октилглюкозид); 2) соли желчных кислот (холат, дезоксихолат); 3) цвиттерионные детергенты (CHAPS, цвнттергент). Но выбор детергента, наиболее приемлемого для солюбилизации и очистки определенного мембранного фермента, по-прежнему осуществляется методом проб и ошибок. |
ККМ, мМ |
Мол.масса |
1 Размер А мнцеллы |
.грегационис число |
х Удельный объем, мл/г |
Ссылки |
|
Долецилсульфат |
1,33 |
288 |
24 500 |
85 |
0,864 | |
|
натрия | ||||||
|
Холат натрия " |
3 |
408 |
2100 |
5 |
0,778 |
(612, 1383] |
|
Дезоксихолат |
0,91 |
392 |
23 000 |
55 |
0,771 | |
|
натрия " | ||||||
|
0,11 |
538 |
68 000 |
12 |
0,973 | ||
|
Тритои Х-100 2) |
0,24 |
628 |
90 000 |
140 |
0,908 | |
|
Твин 80 2) |
0,012 |
1300 |
76 000 |
60 |
0,8% | |
|
Лаурилдиметил- |
2,2 |
229 |
17 000 |
75 |
1,112 |
|612] |
|
аминоксид | ||||||
|
^-D-Октил- |
25 |
293 |
8000 |
27 |
0,820 |
[1242, 1213 |
|
глюкозид |
612] | |||||
|
^-D-Лаурил- |
0,16 |
510 |
50 000 |
98 |
0,820 | |
|
мальтозид | ||||||
|
CHAPS |
8 |
615 |
6150 |
10 |
0,802 | |
|
Цвиттергеит |
3,6 |
335 |
— |
— |
0,957 |
Популярные статьи:
Показатели рациональной
организации учебного процесса
Показателями рациональной организации учебного процесса являются:
· объем учебной нагрузки – количество уроков и их продолжительность, включая затраты времени на выполнение домашних заданий;
· нагрузка от дополнительных занятий в школе ...
Противоречия в системе: природа-биосфера-человек
Взаимоотношения природы и общества нельзя рассматривать вне противоречий, неизбежно возникающих и существующих между ними. История совместного существования человека и природы представляет собой единство двух тенденций. Во-первых, с разви ...
Источники генов для улучшения растений
Генетический код един для всех живых существ. Круг источников генов, которые могут быть использованы для улучшения свойств культурных растений, не органичен миром растений. Гены, выделенные из различных царств, семейств и отрядов живых ор ...